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假皮疽組織胞漿菌PCR檢測試劑盒廠家

產(chǎn)品簡介

假皮疽組織胞漿菌PCR檢測試劑盒廠家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
AD檢測試劑盒可用 40℃水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超過 50℃,使用時(shí)洗滌液溫度應(yīng)為室溫

更新時(shí)間:2021-03-14
訪問次數(shù):381
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組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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 產(chǎn)品名稱

 假皮疽組織胞漿菌PCR檢測試劑盒廠家

 英文名稱

 Histoplasma farciminosumPCR

 貨號(hào)

 LZP6850

實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
小鼠維生素E(VE)elisa試劑盒Anti-POLR1B Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體  

小鼠維生素C(VC)elisa試劑盒Anti-POLQ Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體  

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa試劑盒Anti-POLR1C Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體  

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)elisa試劑盒Anti-POLR2E Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞膜受體  

兔補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒Anti-POLR2J Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 G蛋白偶聯(lián)受體  

豚鼠白介素22(IL-22)elisa試劑盒Anti-POLR2J Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶  

人胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)elisa試劑盒Anti-POLR3B Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶  

人促生長激素釋放激素(GHRH)elisa試劑盒Anti-POLR3A Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號(hào)  

犬雌二醇(E2)elisa試劑盒Anti-POLR3A Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

C肽(C-Peptide)elisa試劑盒Anti-POLR3D Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

牛腎上腺髓質(zhì)素(ADM)elisa試劑盒Anti-POLR3D Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 結(jié)合蛋白 表觀遺傳學(xué)  

貓白介素8(IL-8/CXCL8)elisa試劑盒Anti-POLR3D Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞膜受體  

大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α )elisa試劑盒Anti-POLR3E Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 表觀遺傳學(xué)  

大鼠超氧化物歧化酶錳線粒體(SOD2)elisa試劑盒Anti-POLR3E Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

鹿黃嘌呤氧化酶(XOD)elisa試劑盒Anti-POLR3G Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

TCBS 瓊脂平板Anti-HAI-1   虎杖苷

營養(yǎng)瓊脂Anti-HBA1  黃芪甲苷

革蘭氏染色液Anti-HRCAg/HBV   灰氈毛忍冬皂苷乙

無鹽胰胨Anti-HBV/pre S1/S2 protein  黃藤素

3%胰胨Anti-β-HCG 黃芩苷

6%胰胨Anti-HCCR-1  黃豆黃苷

培養(yǎng)基Anti-α -HCG α )  標(biāo)準(zhǔn)品

8%胰胨Anti-HCV-Core  黃芩素

10%胰胨Anti-HCV-HCBP1/ACY-3  漢黃芩苷

三糖鐵瓊脂Anti-HCV-NS1  哈巴俄苷
假皮疽組織胞漿菌PCR檢測試劑盒廠家D-Allose,98%通用試劑 100MG

N-Acetyl-D-galactosamine,98%通用試劑 100MG

L-(?)-Xylose,≥99%通用試劑 5G

Acesulfame K,≥99.0%通用試劑 25G

D-Pase,≥98%通用試劑 25MG

D-(+)-Melezitose mohydrate,≥99%通用試劑 5G

β-Lactose,≥99%通用試劑 25G

Lactulose,≥95%通用試劑 5G

Maltotriose,≥95%通用試劑 1G

Manse triflate,98%通用試劑 100MG

1,2:5,6-Di-O-isopropylidene-α-D-gluco...通用試劑 25G

3-O-Methyl-D-glucopyrase,≥98%通用試劑 1G

L-(?)-Sorbose,≥98.0%通用試劑 25G

α-Chloralose通用試劑 25G

Inulin from dahlia tubers通用試劑 10G

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