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傳染性非典型肺炎病毒PCR檢測試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關產品:Cyclin-D2 ELISA 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
產品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 傳染性非典型肺炎病毒PCR檢測試劑盒價格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7525 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Moolein噻吩-2-磺酰氯 97%二酸二甲酯 98%
Glycerol trioleate4,4'-二甲苯亞砜 97%二酸二乙酯 99%
Octyl acetate基硫 99%二酸二異酯 99%
HI-EFF-4B二苯基(2,4,6-*?;┭趸?97%雙酮烯酰胺 99%
PVA對甲苯硫酚 99%三氯乙酯 97%
Propylene carbonate苯硫酚 99%()乙酯 CP,98%
Propyl paraben苯乙酮 GR,≥99.0% (GC)乙酸乙酯 99%
IPM1,3-丁二 99%氯甲酯 AR,99.0%
Propyl phenylacetate正十二硫 98%乙酸甲酯 99%
Tributyl borate乙二胺四乙酸四鈉 AR,99.0-102.0% (T)1,3-環(huán)己二酮 97%
Tributyl phosphite乙二胺四乙酸四鈉 CP,98.0%苯肼 AR,98.0%
TEP異佛爾酮 97%三唑磷 分析標準品,>97%(HPLC)
TMP磺酸 99%占噸酮 >98.0%(GC)
TPP1-辛硫 98%3-氨基-1,2- 97%
Triphenyl phosphite3,5,5-*基己酸 97%3-乙酰硫基-2-甲基酰氯 98%
H295 Estersil正戊酸 >99% (GC)2-溴代苯酮 96%
氧化標準溶液(100μg/ml,u=6~5%,基體:酮)c-Kit (D3W6Y) XP® Rabbit mAbLAT/LAT1 T細胞活化連接蛋白抗體
(分析標準品,99%)c-Kit (D3W6Y) XP® Rabbit mAbLASS6 長壽相關基因lASS6抗體
除草標準溶液(10μg/ml,u=5%)Phospho-IRF-3 (Ser386) (E7J8G) XP® Rabbit mAbLASS5 長壽相關基因lASS5抗體
2-萘氧乙酸(標準品)Phospho-IRF-3 (Ser386) (E7J8G) XP® Rabbit mAbLASS4 長壽相關基因lASS4抗體
滅菌丹標準溶液(100μg/ml,u=2%)GCK AntibodyLASS3 長壽相關基因lASS3抗體
滅菌丹標準溶液(10μg/ml,u=6%)OTUB1 (D8F7) Rabbit mAbLASS2 腫瘤轉移抑制基因1抗體
標準溶液(100μg/ml,u=4%)MX1 (D3W7I) Rabbit mAbLASS1 長壽相關基因lASS1抗體
惡草酮(分析標準品,97.5%)Thrombospondin-1 (D7E5F) Rabbit mAbLAS2/C18orf54 肺腺瘤易感蛋白2抗體
甲基嘧啶磷(10μg/ml,u=3%)Phospho-Akt (Ser473) (736E11) Rabbit mAblarge S protein 人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體
撲滅津(標準品)Phospho-Akt (Ser473) (736E11) Rabbit mAbLARG Rho的鳥嘌呤核苷酸交換因子12抗體
傳染性非典型肺炎病毒PCR檢測試劑盒價格α2巨球蛋白(α-2M)抗體Sessilifoline A中文名:別名:分子式:C22H315
ACCSL蛋白抗體Benzamide中文名:別名:分子式:C7H7
轉錄激活蛋白crsp70抗體N1,N10-Bis(p-coumaroyl)spermidine中文名:別名:分子式:C25H31N3O4
粘附分子IgG樣結構域蛋白1抗體Acetamide中文名:別名:分子式:C2H5
突觸融合結合蛋白6抗體19,20-(E)-Vallesamine中文名:別名:分子式:C20H24N2O3