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狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒英文名稱:human Anti-Thyroid Microsome Antibody,ATMA/TMAB ELISA Kit*人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Collagen autoantibody,CLA ELISA Kit*人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒英
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 豬布氏桿菌PCR檢測試劑盒廠家 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7894 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
焦棓酚紅Phospho-ALK (Tyr1586) Antibody3,5-二甲基異噁唑-羧酸
(2-吡啶基)-5,6-雙(磺基)-1,2,三二鈉鹽水合物(>98.0%(HPLC))Jak1 (6G4) Rabbit mAb溴-甲酸,97%
2-鄰羥亞芐基氨基酚(>95.0%(T))Jak1 (6G4) Rabbit mAb(R)-哌啶甲酸酯
鋅試劑NME1/NDKA (D98) AntibodyN-甲基鄰
1,2-雙(二甲膦基)烷(>95.0%(GC))Ikaros (D6N9Y) Rabbit mAb (PE Conjuga)十二烷基磺酸鈉
內消旋-2,二巰基丁二酸(>98.0%(T))SEK1 (5C10) Rabbit mAb氟-
N-(2,6-二基氨酰甲基)亞氨基二酸(>98.0%(HPLC)(T))Nestin (10C2) Mouse mAb環(huán)丁基
N-(2,6-二基氨酰甲基)亞氨基二酸(>99.0%(HPLC)(T))Synaptotagmin-1 Antibody2-溴并噻唑
1-羥基亞基-1,1-二膦酸(約60%水溶液,約4.2mol/L)BOB-1/OBF-1 Antibody二十二碳六酸
亞甲基二膦酸(>95.0%(T))Phospho-ALK (Tyr1586) (3B4) Rabbit mAb(嗎啉基)
吡哆-L-谷氨酸二鹽[藥物研究配體]SGTA Antibody硝基茴香硫
吡哆-L-異亮氨酸鹽[藥物研究配體]ApoA1 (5F4) Mouse mAb一縮二
1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽酸鹽(>98.0%(N))UTX (D3Q1I) Rabbit mAb庚酰
己二酸雙(2-基己基)酯(>98.0%(GC))CD79A Antibody基*氧基硅烷
叔戊基酚(>98.0%(GC))CD79A Antibody2-氨基-6-并噻唑
己基酚(>98.0%(GC))Stathmin Antibody【口+奈】啶
正庚基酚(>98.0%(GC))Stathmin Antibody喹唑啉
戊基酚(>97.0%(GC))Phospho-Stathmin (Ser16) Antibody2,二甲基-5-基-1H-吡咯-羧酸
金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒Proasome 20S LMP7 低分子質量蛋白7100 ul
解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒P-selectin/CD62p P選擇素100 ul
解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒L-Selectin/CD62L L選擇素100 ul
解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)ELISA試劑盒E-Selectin/CD62E E選擇素100 ul
睫狀神經營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒Patched/PTCH Patched/PTCH20 ul
結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒CD63/MLA1 黑色素瘤相關抗原100 ul
結締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒CD64/IGFR1 免疫球蛋白G Fc段受體I100 ul
結蛋白(Des)ELISA試劑盒CD66a/CEACAM1 癌胚抗原相關細胞粘附分子11 Kit
窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒PN/MMAC1(NT) 一種腫瘤抑制基因(N端)100 ul
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