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細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒

產(chǎn)品簡介

細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒的銷售產(chǎn)品:腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體MCM2/FITC 熒光素標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白2抗體IgG
誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白1抗體MCM3/FITC 熒光素標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白3抗體IgG
細(xì)胞內(nèi)流鉀通道Kir4.1抗體Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液(HBSS)不含NaHCO3
107-43-7標(biāo)準(zhǔn)品谷胺氨溶液(100X)
60-80-010倍Hanks平衡鹽緩

更新時(shí)間:2022-06-20
訪問次數(shù):1156

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商品介紹:

本試劑盒是針對(duì)細(xì)胞凋亡過程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設(shè)計(jì)的。可以非常有效地抽提小片段為180-200bp的DNA ladder,同時(shí)又可以抽提到50kb以上的基因組DNA。DNA ladder也稱DNA fragmentation,是細(xì)胞凋亡的一個(gè)重要指標(biāo)。通常觀察到DNA ladder,就可以判定細(xì)胞發(fā)生了凋亡。本試劑盒足夠抽提50個(gè)細(xì)胞或組織樣品。

試劑盒組份:

樣品裂解液———30ml

蛋白酶K————130μl

10M 醋酸銨——6ml

TE——————6ml

注意事項(xiàng):需自備Tris平衡ben酚、氯仿和無水乙醇。

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。

中文名稱:細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒

英文名稱:DNA fragmentation Extraction Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50次

產(chǎn)品貨號(hào):LZ-01X6325

發(fā)貨周期:1~3天

公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

7.jpg 

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
脂肪合成(FASN)英文名稱:FASN ELISA KitASTE1蛋白抗體包裝25g

脂多糖/內(nèi)毒(LPS)英文名稱:LPS ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4B抗體包裝500g

脂蛋白脂(LPL)英文名稱:LPL ELISA Kit微絲相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)英文名稱:Lp-PL-A2 ELISA Kit腺苷A1A受體抗體包裝5g

脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)英文名稱:Lp-PLA2 ELISA Kit芳基硫酯B抗體包裝25g

脂蛋白α(Lp-α)英文名稱:Lp-α ELISA Kitγ基丁轉(zhuǎn)抗體包裝5g

正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)英文名稱:RANTES/CCL5 ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

整合αM(Itgam/CD11b)英文名稱:Itgam/CD11b ELISA Kit腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換包裝1g

整合α-IIb(Itga2b/CD41)英文名稱:Itga2b/CD41 ELISA Kit芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體包裝250mg

整合α5(Itgax/CD11c)英文名稱:Itgax/CD11c ELISA KitAlkB同源蛋白8抗體包裝25g

長停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)英文名稱:gas-6 ELISA KitABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體包裝5g

粘蛋白/粘液7(MUC7)英文名稱:MUC7 ELISA KitRho GTP激活蛋白20抗體包裝250mg

粘蛋白/粘液5B(MUC5B)英文名稱:MUC5B ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族10抗體包裝500g

粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)英文名稱:MUC5AC ELISA Kit乙脫氫1蛋白家族L1抗體包裝25g

粘蛋白/粘液2(MUC2)英文名稱:MUC2 ELISA Kit軸抑制蛋白2抗體包裝5g

gp130結(jié)合蛋白GAM抗體基質(zhì)金屬蛋白9(MMP9)Lumacaftor (VX-809; VRT 826809) 是 CFTR 調(diào)節(jié)劑,可糾正 CFTR 蛋白的折疊和運(yùn)輸。
細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒暗孢節(jié)菱孢 鞣花酸5-羥色轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白Elisa

鴨艾耳球蟲 鞣花酸5脂加氧Elisa

就地堆肥地芽孢桿 鹽侖特羅6酮酰四氫蝶呤合Elisa

大腸桿987P因子血清 異丁香甲6酮前列腺Elisa

異配囊接霉卵孢變種 潑龍6酮前列腺F1aElisa

蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 波姆934P70kDa熱休克蛋白5Elisa

釀酒酵母 小豆蔻明8-羥基鳥DNA糖苷Elisa

白黃小脆柄菇 酮麝香8羥基脫氧鳥苷Elisa

泡盛曲霉 低密度聚乙烯8異前列腺Elisa

雜色曲霉原變種 頭鈉8-異前列腺F2αElisa

枯草芽孢桿 長葉烯Ⅰ型膠原C端肽Elisa

牛邊緣無漿體(獨(dú)山株) 血管緊張IIⅠ型膠原N末端肽Elisa

麥芽糖假絲酵母 惡唑Ⅰ型膠原α1Elisa

首爾鏈霉 2-O-α-D-吡喃葡糖基-L-抗壞血酸Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽Elisa

異常漢遜酵母 莫諾苯宗Ⅰ型前膠原C末端肽Elisa


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