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PREG孕烯醇酮ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:Nanog/FITC 熒光標記胚胎干關鍵蛋白抗體IgG3-(三氟)芐 98%NAIF1 protein/FITC 熒光標記核凋亡誘導因子蛋白1抗體IgG3-氟-5-(三氟)苯 97%NAP1 /FITC 熒光標記核小體組裝蛋白1抗體IgG虎杖 98%PNAT/NAT2/FITC 熒光標記N-酰轉(zhuǎn)移2抗體IgG雙三氟磺酰亞鋰 99%
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關文章
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產(chǎn)品名稱 | PREG孕烯醇酮ELISA試劑盒 |
英文名稱 | PREG ELISA kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028648 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒對乙烯愈瘡木酚3-[(3-膽固氨)二氨]-1-磺 98%吡啶-3,4-二羧 98%
質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒磺對氧嘧啶2-環(huán)己乙磺 ≥99.0% (T)2,6-吡啶二 97%
質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)試劑盒2-萘酚-8-磺4--7-硝-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 98%4-苯磺酰異酯 96%
質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)試劑盒磺異惡唑9,9-二-2,7-二溴芴 98%2-(三乙酰)吡咯 99%
質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)試劑盒鹽環(huán)沙星二硫蘇糖 99%鹽多巴 98%
質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)試劑盒高紫檀素 二硫蘇糖 用于分子生物學, ≥99%(±)-α-煙酚
質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)試劑盒杠柳元二硫蘇糖 用于電泳, ≥99%反二 CP,99.0%
質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)試劑盒甘油三酯1,8-二氮-9-芴 99%碳胍 99%
FMS樣酪氨激3(Flt3)試劑盒α-戊二N,N'-二環(huán)己-4-嗎啉脒 98%異抗壞血鈉 98%
FMS樣酪氨激3(Flt3)試劑盒D-熒光素鹽DNA ≥300 Kunitz units/mg protein三氧化二銻 SP
FMS樣酪氨激3配體(Flt-3L)試劑盒對羥苯乙3,3'-二氨聯(lián)苯 99%三氧化二銻 99.99% metals basis
FMS樣酪氨激3配體(Flt-3L)試劑盒毛花C3,3'-二氨聯(lián)苯 97%三氧化二銻 AR,99.5%
血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)試劑盒毛旋花子K2,7-二溴芴 96%三氧化二銻 99.9%,平均粒徑:0.7 µm
血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)試劑盒瑞鮑迪甙B2,6-二酚靛鈉鹽 AR三氧化二銻 99.999% metals basis
α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)試劑盒去氧脫水內(nèi)酯3,5-二-2-羥苯磺鈉 99%三氧化二銻 CP,99%
α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)試劑盒磺舒 3,3'-二氨聯(lián)苯四鹽鹽水合物 98%β-氨乙酯鹽鹽 98%
PREG孕烯醇酮ELISA試劑盒乙酰氧甲基(AM)的酯衍生物及其螯合劑組成的熒光探針是進行多數(shù)活細胞研究時用到的廣泛的化合物。修飾過的羧與AM 酯基團可以生成不帶電荷的分子,具有細胞膜透性。但一進入細胞內(nèi),親脂性的保護集團發(fā)生非特異性的水解,從而生成帶電荷形式,滯留于胞內(nèi)。通常情況下,AM 酯形式探針為無色無熒光狀態(tài),除非發(fā)生水解,這一屬性對于儲存來說,也是非常有用的自發(fā)水解的判斷標準。
濃度:1 mg/mL in DMSO
儲存:-20℃,避光,有效期6個月
操作步驟:
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。