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MOVAS細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化分裂周期蛋白16抗體金屬硫蛋白抗原精氨酸葡萄糖斜面瓊脂白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體層粘連蛋白受體1抗體苯氨酸瓊脂培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類
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盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè),這樣通??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱:小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱:MOVAS細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X969566
規(guī)格:T25
生長(zhǎng)特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
血管生成素相關(guān)蛋白5凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原V-P半固體瓊脂
錨蛋白重復(fù)域53抗體抑癌基因抗原胰蛋白胨水肉湯
錨蛋白重復(fù)域54抗體蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原明膠培養(yǎng)基
ATP合成酶β5抗體人巨病UL49抗原靛基質(zhì)培養(yǎng)基
肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白3抗體黑皮質(zhì)素-1受體抗原二酸鹽培養(yǎng)基
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體髓樣白血病-1抗原脫氧核糖核酸酶瓊脂
肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白1抗體多藥耐藥蛋白抗原賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基
β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體(X11β)肌增強(qiáng)因子2抗原脫羧酶對(duì)照試驗(yàn)培養(yǎng)基
乙酰輔酶A結(jié)合蛋白抗體線粒體融合蛋白1精氨酸雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基
磷酸化分裂周期蛋白16抗體金屬硫蛋白抗原精氨酸葡萄糖斜面瓊脂
白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體層粘連蛋白受體1抗體苯氨酸瓊脂培養(yǎng)基
活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫氨酶抗體層粘連蛋白受體1抗原(C端)假單胞P瓊脂
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原假單胞F瓊脂
ADP核糖基化因子3抗體肌球蛋白輕鏈3抗原衛(wèi)矛半固體瓊脂
含氨酰tRNA合成酶結(jié)構(gòu)域1抗體巨噬移動(dòng)抑制因子抗原瓊脂
MOVAS細(xì)胞鋅指蛋白206抗體10-去乙酰紫杉 DEACETYLTAXOL, 10-(P)Human, Mouse
緊密粘連蛋白ZO-3抗體10-去乙酰紫杉 DEACETYLTAXOL, 10-(P)Human
鋅指蛋白ZBT10抗體去乙酰毛花苷 C DEACETYLLANATOSIDE C(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白BED抗體去乙酰毛花苷 C DEACETYLLANATOSIDE C(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白217抗體DEBENZOYL-N-ISOPENTANOYLTAXOL, N-(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白575抗體DEBENZOYL-N-(S)-2-METHYLBUTANOYLTAXOL, N-(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白X染色體蛋白抗體DATISCOSIDE(RG)Human
抑制蛋白4抗體DATISCOSIDE(P)(PLEASE CALL)Human
透明帶黏附蛋白ZAN抗體DATISCIN(RG)Human, Mouse